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產(chǎn)品中心
酵母感受態(tài)細(xì)胞 克隆與表達(dá)分析

酵母感受態(tài)細(xì)胞 克隆與表達(dá)分析

簡(jiǎn)要描述:

AH109 Chemically Competent Cell 酵母感受態(tài)細(xì)胞 克隆與表達(dá)分析,AH109是MATa型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?;蚺cMATα型酵母菌株Y187通過(guò)接合(mating)操作進(jìn)行蛋白相互作用驗(yàn)證或雙雜交文庫(kù)篩選和構(gòu)建。

產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-21

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AH109 Chemically Competent Cell

酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

 

溫馨提示

見(jiàn)我司整理的酵母雙雜交(Yeast two-hybrid assay)產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品標(biāo)簽

Matchmarker GAL4雙雜交系統(tǒng);Y2HGold;pGBKT7;Y187pGADT7;AUR1-CAureobasidin A AbA);金擔(dān)子素;

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

AH109 Chemically Competent Cell

酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

MF2356-1000UL

10×100μl

290

MF2356-5000UL

50×100μl

1320

產(chǎn)品包裝

組分編號(hào)

組分名稱

保存

貨號(hào)(規(guī)格)

MF2356-1000UL

MF2356-5000UL

MF2356-A

AH109 Chemically Competent Cell

-80

10×100μl

50×100μl

MF2356-B

pGADT7 Control Vector (10ng/μl)

-80

10μl  

10μl  

MF2356-C

Carrier DNA (5μg/μl)

-20

100μl 

500μl 

MF2356-D

PEG/LiAC Solution

+4

5ml

25ml

產(chǎn)品描述

AH109GAL4系統(tǒng)酵母雙雜交用實(shí)驗(yàn)菌株,來(lái)源于PJ69-2A酵母菌株,引入lacZ報(bào)告基因從而產(chǎn)生AH109。

AH109MATa型,能直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒或與MATα型酵母菌株Y187通過(guò)接合(mating)操作進(jìn)行蛋白相互作用驗(yàn)證或雙雜交文庫(kù)篩選和構(gòu)建。AH109-GAL4酵母雙雜交系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用,分別為pGBKT7pGADT7。前者篩選標(biāo)志為Trp,用于表達(dá)DNA-BD與誘餌蛋白(bait)的融合蛋白;后者篩選標(biāo)志為Leu,用于表達(dá)AD與誘捕蛋白(prey)的融合蛋白。AH109有四個(gè)報(bào)告基因:lacZ,HIS3, ADE2, MEL1,分別由三個(gè)*異源的Gal4反應(yīng)啟動(dòng)元件-G1,G2,M1調(diào)控,這三種啟動(dòng)子只有GAL4識(shí)別的17bp核心區(qū)相同,其余部分都不同。這一特征有效縮減假陽(yáng)性發(fā)生的概率。因?yàn)?,任何誘捕蛋白單獨(dú)結(jié)合引起假陽(yáng)性都需要識(shí)別3個(gè)不同序列,激活4個(gè)報(bào)告基因表達(dá)。

本品為經(jīng)特殊工藝制備的AH109酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞,用pGADT7質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μg DNA。且在-80能穩(wěn)定保存三個(gè)月。

基因型

MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UAS-Gal1TATA-His3, MEL1GAL2UAS- Gal2TATA-Ade2, URA3::MEL1UAS-MEL1TATA- lacZ

注意事項(xiàng)

1/在冰上融化感受態(tài)細(xì)胞。

2/轉(zhuǎn)化高濃度質(zhì)??上鄳?yīng)減少用于涂板的菌量。同時(shí)轉(zhuǎn)化2-3種質(zhì)??蛇m當(dāng)增加質(zhì)粒的用量。

3/AH109對(duì)高溫敏感,zui適生長(zhǎng)溫度為27-30,一旦高于31,生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化率都呈指數(shù)下降。

4/菌落變粉紅色并不是污染,而是酵母細(xì)胞生長(zhǎng)中的一種常見(jiàn)現(xiàn)象。當(dāng)酵母細(xì)胞在平板上培養(yǎng)幾天,將平板內(nèi)的腺嘌呤消耗殆盡,那時(shí)酵母試圖通過(guò)自身代謝途徑合成腺嘌呤以供利用。然而,某些菌株ADE2基因被破壞,腺嘌呤合成受阻。且ADE4,56,7,8基因均正常。由此,造成中間產(chǎn)物P-ribosylamino imidazoleAIR)在細(xì)胞的積累使得菌落變?yōu)榉奂t色。

5/酵母菌在缺陷培養(yǎng)基上生長(zhǎng)速度比YPDA培養(yǎng)基慢,營(yíng)養(yǎng)缺陷成分越多,生長(zhǎng)越慢,以轉(zhuǎn)化涂板為例:涂YPDA平板于2948h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克?。煌?/span>SD單缺平板于29,48-60h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克?。煌?/span>SD雙缺平板于29,60-80h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克??;涂SD三缺或四缺平板于2980-90h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克??;

6/為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

MF2351-300UL

Y2HGold Yeast Strain 酵母雙雜交用甘油菌

300μl

MF2352-1000UL

Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2353-300UL

Y187 Yeast Strain 酵母雙雜交用甘油菌

300μl

MF2354-1000UL

Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2355-300UL

AH109 Yeast Strain 酵母雙雜交用甘油菌

300μl

MF2356-1000UL

AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10×100μl

MF2501-200T

Yeast Transformation Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒

200T

MS6303-350G

YPDA Agar Medium YPDA瓊脂培養(yǎng)基

350g

MS6304-250G

YPDA Medium YPDA液體培養(yǎng)基

250g

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

 

AH109 Chemically Competent Cell 酵母感受態(tài)細(xì)胞 克隆與表達(dá)分析

AH109 Chemically Competent Cell 酵母感受態(tài)細(xì)胞 克隆與表達(dá)分析

 

 

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